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人血红蛋白检测
一、血红蛋白简介
血红蛋白是生物血液中一种重要的组成成分,红细胞内运输氧的特殊蛋白质,也可以称为是血红素,是使血液呈红色的蛋白。
血红蛋白
血液中还有很多其他的物质,而我们法医上为什么偏爱都是检测血红蛋白呢?因为对于检验某一种混合物来说,混合物所含被检测物质的量、特异性、反应的灵敏程度、稳定性、检测的难易程度都影响了检测的效果和实际应用情况,而相对来说,血红蛋白具备了这些优点。
二、检测方法所依据的标准和原理
《人血红蛋白检测金标试剂条法》GA/T 765-2020规定了法医生物物证检验中通过金标试剂条快速检验人血红蛋白(Hb)的检验原理、材料准备、操作方法、结果判定和检验中的注意事项,准适用于法庭科学检验中判断检验鉴定的检材是否含有人血红蛋白的检测
抗人血红蛋白金标试剂条法的基本原理是金标记双抗体夹心法。
抗人血红蛋白金标试剂条分为三个区,即加样区、反应区和吸附区;
吸附在加样区的金标记单克隆抗人血红蛋白抗体与人血痕浸泡液(含有人血红蛋白)反应后,形成金标记抗原抗体复合物,并向试剂条吸附区扩散,当复合物扩散至反应区时,与吸附于此区的另一单克隆抗人血红蛋白抗体结合(线状)抗原抗体复合物聚集该处,形成紫红色线阳性反应线),过剩的复合物继续向吸附区扩散,与反应区吸附的另一抗体(通常是羊抗鼠IgG)结合,也形成紫红色线条(质控线);
如果浸泡液不含有人血红蛋白,则加样区就不能形成抗原抗体复合物,扩散至反应区的金标抗人血红蛋白抗体就不能与吸附于此区的另一单克隆抗人血红蛋白抗体结合,也就没有紫红色线状带形成当它继续向吸附区扩散,可与反应区另一吸附的羊抗鼠1gG结合,形成紫红色线条(质控线)。
三、检测方法
检测方法:取适量检材(检验鉴定中应做已知样本的阳性对照和空白处的阴性对照),放入1.5mL~2mL离心管中,加人适量的三级纯水(GB/T 6682-2008中规定),探荡,浸泡约30min(材陈旧,则浸泡时间应延长),13000/min离心5min取上清液(如果案件现场检材条件较好,可不进行震荡器振荡和离心机离心),取出检验试剂条将试剂条上带有MAX标记一端插入上清液中并计时(检材置于浸泡液中,不应超过MAX线),或将适量检材浸泡液滴加到试纸条加样区,约5min后取出试剂条,观察结果。
当检测线为紫红色,质控线也为紫红色,则说明浸泡液中含有人血红蛋白;当检测线未出现紫红色,质控线为紫红色,则说明浸泡液中无人出红蛋白当检测线和质控线均未出现紫红色,说明此试剂条无效,应换试剂条重新检验,另外试剂盒包装破损、试剂条有折痕等现象,应另取试纸条进行检验。
简单总结一下就是:阳性对照和阴性对照均正确时,两条阳、一条阴,零条重做。
图1金标试剂条检验人血红蛋白示意图
河北华科大司法鉴定中心是经河北省司法厅核准成立的综合性大型司法鉴定机构,司法鉴定许可证号:130119304,鉴定报告全国通用。中心以先进的仪器设备、经验丰富的专家团队为依托开展司法鉴定工作,拥有现代化的法医病理解剖室和实验室、法医临床视听和神经电生理室、法医物证实验室和法医毒物检验检测实验室,营业面积4000多平方米。
鉴定业务范围包括法医病理鉴定(法医病理诊断、死亡原因分析、虚拟解剖等)、法医临床鉴定(损伤程度鉴定、伤残鉴定、“三期”鉴定等)、法医物证鉴定(个体识别、亲子鉴定等)、医疗损害鉴定(医疗损害后果评定、医疗过错评定、医疗过错与损害的因果关系评定)和法医毒物鉴定(人体体液中乙醇定性定量分析)。
来源:知乎
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